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原載自：www.xrpalvh.cn[行情動態] 2021-09-10 瀏覽次數：962

　　ATCC細胞說明書有關于細胞復蘇和傳代的詳細步驟，除說明書外，還有另外一份重要文件-COA（Certificate of Analysis）。COA中包含具體批次信息，如每管細胞的數量，建議復蘇使用的培養基用量，已知細胞的傳代代次等重要信息。

　　ATCC細胞的分類檢測步驟如下：

　　1.樣本儲存

　　收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-70℃可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。

　　2.試劑盒成分

　　人、綿羊、小鼠、大鼠、豬、兔、山羊、牛、馬、豬；植物細胞因子、骨代謝、細胞凋亡、激素內分泌、活性多肽、肝纖維化、自身抗體科研Elisa檢測試劑盒。主要用于科研方面，不用于臨床診斷。可以用于檢測各種指標。

　　相關操作方法：

　　1.取成年新西蘭大白兔，耳緣靜脈注射空氣處死后，取下兔子的雙腿，立即用75%乙醇浸泡。

　　2.移入細胞房內，去除雙腿表面的皮毛及肌肉，剪取關節段，移至超菌工作臺內。

　　3.PBS洗滌數次，用手術刀或彎剪將關節表面的軟骨組織取下。

　　4.軟骨組織塊靜置5min，棄去上層液體及懸浮組織，將軟骨組織剪成1mm3的大小。移到離心管中加3倍體積的0.25%胰蛋白酶，置入37℃的恒溫搖床中，振蕩消化15-20min。

　　5.4℃靜置5min；棄上清，PBS洗滌，去上清。加入0.2%膠原酶II，置入37℃的恒溫搖床中，振蕩消化2H。

　　6.加入生長培養基終止消化，反復吹打后依次通過200目濾網。收集濾液，1200rpm離心8min，棄上清，用DMEM*培養基重新懸浮細胞，放入37℃，5%CO2細胞培養箱中培養。

　　7.細胞傳代后放入預置有薄骨片或蓋玻片的培養板中進行培養。細胞*展開后即可固定做原代鑒定。